ATCC培養(yǎng)基的制備涉及到幾個(gè)關(guān)鍵的步驟,包括準(zhǔn)確稱量試劑、調(diào)節(jié)pH值、過濾、分裝、滅菌等。
在制備培養(yǎng)基時(shí),需要根據(jù)不同的菌類和用途選擇適宜的培養(yǎng)基,將必需的試劑進(jìn)行嚴(yán)格稱量,并確保所有化學(xué)藥品的純凈和準(zhǔn)確。培養(yǎng)基的各種成分需放入容器內(nèi)加熱溶解,補(bǔ)充水分后測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)定,并用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)至適宜范圍內(nèi)。
將溶解的培養(yǎng)基通過過濾裝置進(jìn)行過濾至透明,以去除不溶物和雜質(zhì)。然后將過濾后的培養(yǎng)基分裝于試管或三角瓶?jī)?nèi),塞好棉塞,用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。培養(yǎng)基的滅菌通常采用高壓蒸汽滅菌法。
ATCC培養(yǎng)基的存放要求包括溫度控制、避免污染、防止光照和保持密封等。這些存放條件對(duì)于確保培養(yǎng)基的品質(zhì)和有效性至關(guān)重要。以下將詳細(xì)闡述這些存放要求:
1.溫度控制
冷藏保存:大多數(shù)ATCC培養(yǎng)基需要冷藏保存,一般溫度控制在2-8℃。這有助于延長(zhǎng)培養(yǎng)基的有效期,同時(shí)減緩微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)。
特定溫度:對(duì)于某些特殊培養(yǎng)基,可能需要在室溫或其他特定溫度下保存,這取決于培養(yǎng)基的配方和使用要求。
2.避免污染
無菌操作:在打開培養(yǎng)基容器之前,需要進(jìn)行無菌操作,避免微生物污染。操作過程中應(yīng)保持手部和環(huán)境的清潔。
密封存放:未開封的培養(yǎng)基應(yīng)保持在原包裝中密封存放,一旦打開,應(yīng)將剩余培養(yǎng)基迅速密封并放回冷藏環(huán)境。
3.防止光照
避光保存:部分培養(yǎng)基成分可能在光照下發(fā)生降解,因此需要在避光條件下保存。尤其是含有敏感成分的培養(yǎng)基,更需注意防止光照。
4.保持密封
干燥劑:大多數(shù)培養(yǎng)基在濕度較高的環(huán)境下容易變質(zhì),應(yīng)保持存放環(huán)境的相對(duì)干燥。可以使用干燥劑來幫助控制濕度。
密封容器:培養(yǎng)基容器必須在使用后重新密封,以防止空氣和水汽進(jìn)入,影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。
5.ATCC培養(yǎng)基定期檢查
檢查保質(zhì)期:在存放期間,應(yīng)定期檢查培養(yǎng)基的保質(zhì)期,確保在使用前沒有過期。過期的培養(yǎng)基可能會(huì)失去營(yíng)養(yǎng)或出現(xiàn)污染,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
觀察外觀:定期檢查培養(yǎng)基的顏色、氣味和透明度等外觀特征,若發(fā)現(xiàn)異常,應(yīng)及時(shí)處理,以免影響實(shí)驗(yàn)效果。
6.正確標(biāo)記
標(biāo)簽信息:在存放培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)在容器上標(biāo)明相關(guān)信息,如名稱、配制日期、有效期等,以便使用時(shí)能夠準(zhǔn)確識(shí)別。
分類存放:不同類型的培養(yǎng)基應(yīng)分類存放,例如血瓊脂培養(yǎng)基和巧克力培養(yǎng)基應(yīng)分開放置,避免混淆。