超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法,重復(fù)性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體等樣品制備中建立標(biāo)準(zhǔn)操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管可實(shí)現(xiàn)*快速樣品濃縮和*高回收率,適用于移液器回收的死體積設(shè)計(jì)可避免濾液干燥,有助于高度濃縮樣品的回收。通常用于生物學(xué)、分子生物學(xué)、生化等領(lǐng)域的研究中。
超濾管的使用步驟:
① 預(yù)處理:
新超濾管:使用前用純水浸泡,冰箱預(yù)冷10 min。然后將水倒出,置于冰上預(yù)冷2-5 min,加樣。
舊超濾管:倒出管內(nèi)的乙醇浸泡液,用純水沖洗干凈10遍,置于冰上預(yù)冷2-5 min,加樣。
?、? 加樣:
如超濾管中有少許殘留水可將超濾管內(nèi)管倒置1000×g離心1 min,移液槍移取適量樣本加入超濾管中。
?、? 離心:
配平,12000 ×g離心(15-30 min),等達(dá)到目的轉(zhuǎn)速后方可離開(kāi)。
④ 樣本收集 :
外管濾液為除去部分蛋白的樣本上清,如需取濃縮后樣本用于其他實(shí)驗(yàn),則另取外管,內(nèi)管倒置,1000×g離心1-2 min。
?、?nbsp; 清洗
使用完的超濾管用純水反復(fù)清洗5次,再用75%乙醇沖洗3次。